一种基于实时荧光聚合酶链式反应的肉及肉制品中猪源性成分含量测定
周彤；李家鹏；田寒友；杨君娜；邹昊；乔晓玲
中国肉类食品综合研究中心,北京,100068
A RT-PCR Method for Quantitative Determination of Pork-Derived Ingredients in Meat and Meat Products
ZHOU Tong;LI Jia-peng;TIAN Han-you;YANG Jun-na;ZOU Hao;QIAO Xiao-ling
China Meat Research Center, Beijing 100068, China
摘要 为了建立一种基于实时荧光聚合酶链式反应的肉及肉制品猪源性成分含量测定方法,分别以猪线粒体DNA的NADH4基因和16S rRNA基因为靶位点设计猪特异性引物、探针和通用引物、探针,建立猪源性成分含量测定方法,通过特异性、灵敏性、线性、准确度及市售肉制品检测,对该方法体系进行检验和评价.结果表明:建立的猪源性成分含量实时荧光聚合酶链式反应测定方法体系具有良好的特异性及灵敏性,最低可检测到0.4pg/μL纯猪肉DNA;无论是猪特异性体系还是通用体系都呈现良好的线性关系(R2均达到0.999以上)和较宽的线性范围;通过含猪源性成分的模拟混合肉样检测,样品猪源性成分含量的回收率平均值为122.27％,说明该方法具有较高的准确度;通过市售肉制品检测表明该方法可以用来检测实际样品(包括生鲜样品和熟肉样品)中猪源性成分含量.
关键词 ：
实时荧光聚合酶链式反应 ,
猪源性成分 ,
定量 ,
肉类掺假
Abstract ：This study is aimed to establish a real time PCR (RT-PCR) method for quantitative determination of porkderived
ingredients in meat and meat products. The pork-specific primers, universal primers and TaqMan probes were
designed for the mitochondrial NADH4 gene and 16S rRNA, respectively, and the established RT-PCR method was
evaluated by specificity, sensitivity, linear relationship and accuracy by using it to detect commercial meat products.
The method showed a good specificity and was able to detect 0.4 pg/μL pork DNA. Both pork-specific and universal
systems showed a good linear relationship (R2 > 0.999) and a wide linear range. The PCR method showed a high
accuracy and the average recovery of pork-derived ingredients in meat mixtures was 122.27%. It can be used to test
both raw and processed pork products.
Key words ：
real time PCR
pork-derived ingredients
quantification
meat adulteration
基金资助: 国家自然科学基金面上项目(31271877)%北京市优秀人才培养资助个人项目(2011D001055000001)
引用本文:
周彤；李家鹏；田寒友；杨君娜；邹昊；乔晓玲. 一种基于实时荧光聚合酶链式反应的肉及肉制品中猪源性成分含量测定[J]. 肉类研究, 2013, 27(12): 11-15 https://doi.org/10.7506/rlyj1001-8123-201312004
链接本文:
https://www.rlyj.net.cn/CN/10.7506/rlyj1001-8123-201312004 或 https://www.rlyj.net.cn/CN/Y2013/V27/I12/11
[1]
郭润泽，张 颖，杨瑞琴，孙启凡. 基于CRISPR/Cas技术的肉类掺假检测研究进展
[2]
王 冬，李 成，平 华，刘 静，王北洪，李 杨. 猪肉水分含量线性、非线性定量分析模型比较研究
[3]
张从党，王均华，吴海晶，王亚平，汪仕韬，包静云，张亚清. 鸭血制品中猪、鸡、鸭源性成分的多重实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法建立与应用
[4]
邵 彪，高利亭，徐陈红，张 霞，陈 刚，汪少芸. 利用可视基因膜芯片技术与实时荧光定量聚合酶链式反应技术分析肉制品中动物源性成分
[5]
薛宝玲，宋晓彬. 小尾寒羊不同生长阶段肌球蛋白与肌球蛋白重链相关基因的变化
[6]
周 藏，孙晓霞，王金凤，付 琦，王恺睿，刘立兵，王建昌. 同时检测速冻食品中鸡、鸭、猪和牛源性成分实时荧光聚合酶链式反应方法的建立及应用
[7]
张 静，李玉静，张二敬，李紫然，刘静静，李春生. 猪骨骼肌肌钙蛋白T单克隆抗体的制备及鉴定
[8]
韩爱云，张振冉，解立斌，史君坡，剧慧栋，左晓磊. 拉曼光谱技术在肉类掺假检测方面的应用研究进展
[9]
马炳存，崔学文，李琰歆，王 灿，贺巧玲，曹乾超，刘 阳，刘 峥，李增婷，陈学强. 基于实时荧光聚合酶链式反应技术定量检测肉制品中动物源性成分研究进展
[10]
刘立兵，员丽娟，陈敏娜，王金凤，付 琦，孙晓霞，王建昌. 基于微滴式数字聚合酶链式反应技术的肉制品中鸭源性成分的定量检测
[11]
刘立兵，陈敏娜，孙晓霞，张亦琴，付 琦，钱云开，周 巍，郭春海，王建昌. 微滴式数字聚合酶链式反应对香肠制品中鸡、猪、牛源性成分的定量分析
[12]
刘睿茜，其美次仁，李家鹏，韦忆萱，李金春，王守伟. 基于单核苷酸多态性位点的多重实时荧光定量聚合酶链式反应法鉴别当雄高山牦牛肉
[13]
李子欣，尤丽琴，罗瑞明，苑昱东，赵晓策，姬 琛. 滩羊肉风味形成中重要蛋白质的解析
[14]
刘立兵，石蕊寒，项佳林，孙晓霞，付 琦，王金凤，周 巍，王素华，郭春海，王建昌. 应用微滴式数字聚合酶链式反应定量检测牛肉制品中的猪源性成分
[15]
张秀平，苗 丽. 实时荧光聚合酶链式反应检测肉制品中的鸭源性成分
2013, Vol. 27 
